本发明是有关于一种纯化以化学式1表示的阿德福韦酯的新颖方法。本发明的纯化方法包括纯化以化学式1表示的高纯度阿德福韦酯的方法,其通过下列步骤:在水中或含水混合溶剂中溶解含有合成反应期间生成的副产物的不纯的阿德福韦酯或其盐类或其错合物;经由逆相管柱来纯化阿德福韦酯溶液;以及添加碱至经纯化的阿德福韦酯溶液,接着以有机溶剂来萃取阿德福韦酯溶液。另外,本发明包括一种以化学式1表示的阿德福韦酯的高纯度非晶溶液的制备方法,以化学式1表示的阿德福韦酯是通过上述方法纯化。
1.一种阿德福韦酯的纯化方法,阿德福韦酯以化学式1表示,所述方法包括下列步骤:在水中或含水混合溶剂中溶解含有副产物的化学式1的阿德福韦酯或其盐类,以形成阿德福韦酯溶液;以及经由逆相管柱来纯化所述阿德福韦酯溶液:[化学式1] ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/> 其中经纯化的阿德福韦酯具有95%或更高的纯度的非晶阿德福韦酯,其中所述逆相管柱是以C₁₈十八基填充,且所述逆相管柱的流动相的pH值为0.1至5,以及其中所述阿德福韦酯的纯化方法还包括添加碱至经纯化的所述阿德福韦酯溶液,并以有机溶剂来萃取阿德福韦酯的步骤,且其中通过添加碱,以调整所述阿德福韦酯溶液的pH值为2.5至10。
2.如权利要求1所述的阿德福韦酯的纯化方法,其中所述经纯化的阿德福韦酯具有99%或更高的纯度的所述非晶阿德福韦酯。
3.如权利要求1所述的阿德福韦酯的纯化方法,其中通过将酸添加至所述水或所述含水混合溶剂,以调整所述水或所述含水混合溶剂的pH值为0.1至5。
4.如权利要求3所述的阿德福韦酯的纯化方法,其中所述酸为盐酸、硫酸、硝酸或甲磺酸。
5.如权利要求1所述的阿德福韦酯的纯化方法,其中所述有机溶剂为二氯甲烷或乙酸异丙酯。
6.如权利要求1至4中任一项所述的阿德福韦酯的纯化方法,其中所述副产物为一或多个选自于由下列副产物1至副产物5所组成的群组:[副产物1] ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/> [副产物2] ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/> [副产物3] ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/> [副产物4] ntent="drawing" img-format="tif" inline="yes" orientation="portrait" wi="700"/>以及[副产物5] ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/>
7.一种非晶阿德福韦酯的制备方法,阿德福韦酯以化学式1表示,所述方法包括:自经根据权利要求1所述的阿德福韦酯的纯化方法纯化的所述阿德福韦酯溶液中移除所述有机溶剂,以制造非晶阿德福韦酯的步骤,其中阿德福韦酯以化学式1表示:[化学式1] ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/>
8.如权利要求7所述的非晶阿德福韦酯的制备方法,其中移除所述有机溶剂的方法是通过在减压的情况下浓缩所述阿德福韦酯溶液。
9.如权利要求7所述的非晶阿德福韦酯的制备方法,其中移除所述有机溶剂的方法是通过将化学式1的阿德福韦酯溶液的浓缩溶液一滴一滴地添加至C₅~C₁₂碳氢化合物,因而形成非晶固体,接着进行过滤。技术领域
本发明涉及一种经改善的阿德福韦酯(adefovirxa0dipivoxil)的纯化方法,阿德福韦酯作为抗病毒剂(antiviralxa0agent),并以9-[2-[[双{(新戊酰氧基)-甲氧基}氧膦基]甲氧基]乙基]腺嘌呤(9-[2-[[bis{(pivaloyloxy)-methoxy}phosphinyl]methoxy]ethyl]adenine)被揭示于美国专利第5,663,159号。xa0本发明涉及一种纯化不纯的以下化学式1所表示的9-[2-[[双{(新戊酰氧基)-甲氧基}氧膦基]甲氧基]乙基]腺嘌呤(“阿德福韦酯”)的新颖方法,以获得至少99%的纯度,其中此化合物会受到经合成所制备的副产物(byproduct)污染。xa0另外,本发明涉及一种非晶阿德福韦酯的制备方法,其通过自经上述方法纯化的以下化学式1所表示的阿德福韦酯的高纯度溶液中移除溶剂。xa0[化学式1]xa0 ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/>
背景技术
阿德福韦酯是一种有用的抗病毒药物,其为核苷酸反转录酶抑制剂(nucleotidexa0reversexa0transcriptasexa0inhibitor),且特别是针对B型肝炎病毒xa0(hepatitisxa0B-typexa0virus,HBV)及人类免疫缺陷病毒(humanxa0immunodeficiencyvirus,HIV)显示出显著的活体内(inxa0vivo)抗病毒活性。阿德福韦酯已经以商标(trademark)“贺维力(Hepsera)”在市场上贩售。xa0举例而言,可以依据美国专利第5,663,159号、第6,451,340号及韩国专利第0618663号、第0700087号叙述的方法来制备阿德福韦酯。这些文件叙述合成化学式1的阿德福韦酯的方法通过使化学式2的阿德福韦(adefovir)作为起始材料而与特戊酸氯甲酯(chloromethylpivalate)发生反应。xa0[化学式2]xa0 ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/> 然而,根据如韩国专利第0624214号所述的已知技术,在合成反应期间会生成下列的副产物1至副产物5。xa0[副产物1]xa0 ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/> [副产物2]xa0 ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/> [副产物3]xa0 ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/> [副产物4]xa0 ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/> [副产物5]xa0 ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/> 因此,在合成阿德福韦酯之后,需要通过纯化过程来移除副产物。xa0另外,可以以非晶固体或晶形固体(crystallinexa0solid)的形式来制备阿德福韦酯,但由于阿德福韦酯的非晶固体的溶解度较高,阿德福韦酯的非晶固体比晶形固体呈现出较快的溶解速率及较高的生物可用性(bioavailability)。由于阿德福韦酯的溶解度增加使得制备各种不同类型的药物配方更为容易,因此需要发展有效的阿德福韦酯的非晶固体。xa0美国专利第5,663,159号揭示的阿德福韦酯的纯化方法是通过正相管柱(normal-phasexa0column)技术,其使用硅胶(silicaxa0gel)作为固定相(stationaryphase)并使用二氯甲烷(dichloromethane)与甲醇(methanol)的混合溶剂作为流动相(mobilexa0phase),因而制备以化学式1所表示的非晶阿德福韦酯。然而,上述方法具有下列问题:随着阿德福韦酯的纯化容量(purificationcapacity)增加,其纯化效率会因扩散效应而减低;且由于杂质的量会根据时程变化(timexa0course)增加,此方法不适合大量生产阿德福韦酯。另外,这些问题造成不可能制备适于用作药剂的高纯度阿德福韦酯。xa0为了解决这些问题,韩国专利第0618663号揭示一种纯化化学式1的阿德福韦酯的经改善的方法,其通过与结晶溶剂相接触。上述方法可用于大量生产具有高纯度的阿德福韦酯。然而,其需要使用大量如正丁醚(n-butylether)的昂贵的结晶溶剂以用于结晶化,且在反应之后需要移除三乙胺盐酸盐(triethylaminexa0hydrochloridexa0salt)的额外过滤步骤。另外,制造具有不同纯xa0度的产物会有高风险,因结晶化的如此繁复的过程。另外,由于结晶阿德福韦酯为通过上述方法的最终产物,因此需要进一步将结晶阿德福韦酯溶解于有机溶剂中以获得非晶阿德福韦酯。xa0
发明内容
因此,本发明的目的在于提供一种新颖的阿德福韦酯的纯化方法,可轻易地大规模生产阿德福韦酯,而不需使用大量的昂贵有机溶剂及额外的过滤步骤,且可生产具有恒定品质的高纯度阿德福韦酯。根据本发明,提供一种通过使用逆相管柱(reverse-phasexa0column)的阿德福韦酯的纯化方法,因而获得高纯度阿德福韦酯(>99%)。另外,不同于已知方法需要将结晶阿德福韦酯溶解于有机溶剂中的额外步骤而获得非晶阿德福韦酯,提供不需这类额外步骤的非晶阿德福韦酯的制备方法。xa0根据本发明的阿德福韦酯的纯化方法,其包括下列步骤:xa0在水中或含水混合溶剂中溶解不纯的以化学式1所表示的阿德福韦酯、其盐类或其错合物,不纯的阿德福韦酯含有合成反应期间生成的副产物;xa0经由逆相管柱来纯化阿德福韦酯溶液;以及xa0添加碱至经纯化的阿德福韦酯溶液,并以有机溶剂来萃取阿德福韦酯溶液。xa0此外,根据本发明,提供一种高纯度非晶阿德福韦酯的制备方法,其通过自经上述方法所获得以化学式1所表示的阿德福韦酯的高纯度溶液中移除溶剂。xa0经本发明的方法纯化的阿德福韦酯含有非常少副产物,且作为高效液相层析(highxa0performancexa0liquidxa0chromatography,HPLC)的结果表示至少约99%的高纯度。xa0另外,由于使用逆相管柱,本发明的方法显示出高纯化效率,使得有可能大量生产高纯度阿德福韦酯。不需要使用昂贵的结晶溶剂或进行额外的过xa0滤步骤,且本发明的方法可经由相对简易的纯化过程来纯化99%或更高的高纯度非晶阿德福韦酯。xa0
附图说明
图1是实例8中经逆相管柱纯化的非晶阿德福韦酯的HPLC层析图,其显示出所获得的非晶阿德福韦酯具有大约99.8%的纯度。xa0图2是实例9中经逆相管柱纯化的非晶阿德福韦酯的HPLC层析图,其显示出所获得的非晶阿德福韦酯具有大约99.7%的纯度。xa0图3是实例10中经逆相管柱纯化的非晶阿德福韦酯的HPLC层析图,其显示出所获得的非晶阿德福韦酯具有大约99.7%的纯度。xa0图4是比较实例2中经正相管柱纯化的非晶阿德福韦酯的HPLC层析图,其显示出所获得的非晶阿德福韦酯具有大约72.8%的纯度。xa0
具体实施方式
以下,将详细叙述根据本发明的纯化方法。xa0在本发明的纯化方法中,下述流程(scheme)1可说明将通过合成反应所制备不纯的以化学式1所表示的阿德福韦酯纯化成高纯度阿德福韦酯的过程。xa0[流程1]xa0 ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/> [含有副产物的阿德福韦酯]xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0[高纯度阿德福韦酯]xa0本发明是关于化学式1的阿德福韦酯的纯化方法,包括下列步骤:xa0在水中或含水混合溶剂中溶解不纯的化学式1的阿德福韦酯、其盐类或其错合物,不纯的阿德福韦酯含有合成反应期间生成的副产物;以及xa0经由逆相管柱来纯化此溶液。xa0[化学式1]xa0 ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/> 根据本发明的方法所纯化的阿德福韦酯的特征是具有95%或更高的纯度,更佳是99%或更高的纯度。xa0在本发明的纯化方法中,通过将酸添加至水或含水混合溶剂,以调整其pH值的范围为0.1至5,较佳是1.0至3。在此,所添加的酸可以是无机酸或有机酸,且其实例可包含盐酸(hydrochloricxa0acid)、硫酸、硝酸(nitricxa0acid)及甲磺酸(methanesulfonicxa0acid),但并不限于此。xa0在本发明的纯化方法中,逆相管柱中使用的流动相的pH值较佳是在0.1至5的范围内,更佳是1.0至3.5的范围内。xa0本发明的纯化方法还可包括添加碱至经纯化的阿德福韦酯溶液,并以有机溶剂来萃取阿德福韦酯溶液的步骤。xa0有机溶剂可较佳是二氯甲烷或乙酸异丙酯(isopropylacetate),但并不限于此。由于添加碱,阿德福韦酯水溶液的pH值的范围被调整为2.5至10。xa0在本发明的纯化方法中所使用的逆相管柱较佳是以C₁~C₁₈烷基(alkyl)填充,更佳是以具有18个碳原子的十八基(octadecyl)填充。xa0欲通过本发明的纯化方法来移除的副产物如下,但并不限于此。xa0[副产物1]xa0 ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/> [副产物2]xa0 ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/> [副产物3]xa0 ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/> [副产物4]xa0 ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/> [副产物5]xa0 ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/> 本发明是关于化学式1的非晶阿德福韦酯的制备方法,其包括下列步骤:自经上述本发明的纯化方法纯化的化学式1的阿德福韦酯中移除有机溶剂。xa0此制备方法的特征是在于:在减压(reducedxa0pressure)的情况下,利用浓缩阿德福韦酯来进行有机溶剂的移除。xa0依照此制备方法,移除有机溶剂的方式较佳是通过将以化学式1所表示xa0的阿德福韦酯的浓缩溶液一滴一滴地添加至C₅~C₁₂碳氢化合物,因而形成非晶固体,接着进行过滤。xa0以下,将更详细叙述根据本发明的阿德福韦酯的纯化方法及制备方法。xa0将含有合成反应期间生成的副产物的不纯的阿德福韦酯加入至有机溶剂中,接着以水清洗。虽然本发明的纯化方法可广泛地用于纯化阿德福韦酯,但用于纯化含有副产物1至副产物5的阿德福韦酯会更有效。xa0纯化方法中所使用的有机溶剂可包含二氯甲烷、乙酸异丙酯、甲苯(toluene)、乙酸乙酯(ethylacetate)及类似物。较佳是使用二氯甲烷或乙酸异丙酯。xa0相继地将水或含水混合溶剂以及酸加入至分离的有机溶剂中,接着在水层(aqueousxa0layer)中萃取阿德福韦酯。在本发明中所使用的含水混合溶剂是指有机溶剂,其中溶解有至少20重量百分比(wt%)的水。合适的有机溶剂的实例可包含C₁~C₄醇、丙酮、乙腈(acetonitrile)、四氢呋喃(tetrahydrofuran)、二恶烷(dioxane)及类似物,但并不限于此。xa0在加入酸之后,含有副产物的阿德福韦酯在有机溶剂中会被转变成其盐类或错合物,因此可以溶解于水或含水混合溶剂中。此处所使用的阿德福韦酯“盐类”或“错合物”这些术语是指,通过将阿德福韦酯与无机酸或有机酸混合而制备的化合物。xa0这里所使用的酸可以是无机酸或有机酸,且考虑到阿德福韦酯的盐类或错合物的形成,适合使用盐酸、硫酸、硝酸及甲磺酸。xa0此外,萃取水溶液的pH值是在0.1至5.0的范围内,较佳是1.0至3.0的范围内。xa0使分离的水溶液通过逆相管柱,将其洗提然后收集而作为析出液(eluate)。如果必要的话,还可以使水溶液(流动相)通过逆相管柱,将其洗提然后收集,水溶液(流动相)具有pH值为0.1至5.0的范围,较佳是1.0至3.5的范围。xa0用于逆相管柱中的填充材料(packagingxa0material)(固定相)包含与水不互溶的聚合物,例如是C₁~C₁₈烷基及HP₂O,较佳是使用具有18个碳原子的十八基。xa0将有机溶剂加入至收集的水溶液中,接着加入碱,因而调整水溶液的pH值的范围为2.5至10。之后,从水溶液中移除有机溶剂。xa0此处所使用的例示性的有机溶剂可包含二氯甲烷、乙酸异丙酯、甲苯、乙酸乙酯及类似物,较佳是使用二氯甲烷或乙酸异丙酯。xa0另外,此处所使用的碱可以是无机碱或有机碱。当考虑到相关化合物的生成时,加入碱的水溶液的pH值较佳是2.5至6.5的范围。xa0之后,移除收集的有机溶剂,因而获得高纯度的经纯化的非晶阿德福韦酯固体。xa0这里,可通过在减压的情况下使水溶液浓缩来移除有机溶剂,且在浓缩的期间,内部温度(innerxa0temperature)较佳是在30°C至90°C之间。xa0除了在减压下进行浓缩以外,可通过一滴一滴地将以化学式1所表示的阿德福韦酯的浓缩溶液添加至C₅~C₁₂碳氢化合物中来移除有机溶剂,C₅~C₁₂碳氢化合物例如是正戊烷、正己烷、正庚烷、环已烷(eyclohexane)及类似物,因而形成非晶固体,并接着过滤。xa0利用本发明的方法所纯化的阿德福韦酯具有95%或更高的纯度,更佳是99%或更高的纯度。xa0以下,为了有助于了解本发明,将提出实例。然而,下列所提供的实例仅是为了轻易地了解本发明,但并非理解为限制本发明的范围。xa0实例1:以化学式1所表示的阿德福韦酯,9-[2-[[双{(新戊酰氧基)-甲氧基}氧膦基]甲氧基]乙基]腺嘌呤的制备方法xa0将100g的9-[2-(膦酰甲氧基)乙基]腺嘌呤(9-[2-(phosphonomethoxy)ethyl]adenine)(“阿德福韦”)与400g的二甲xa0基亚砜(dimethylxa0sulfoxide,DMSO)投入至反应器中。在接着将140mg的三乙胺(triethylamine)与250g的特戊酸氯甲酯加入至反应器之后,加热混合物直到反应温度到达40°C并搅拌5小时。xa0在降低反应温度到10°C至20°C之后,加入500ml的二氯甲烷与1000ml的蒸馏水,接着搅拌5分钟。之后,分离有机层。xa0实例2:以化学式1所表示的阿德福韦酯,9-[2-[[双{(新戊酰氧基)-甲氧基}氧膦基]甲氧基]乙基]腺嘌呤的制备方法xa0将100g的9-[2-(膦酰甲氧基)乙基]腺嘌呤(“阿德福韦”)与400ml的N-甲基-2-吡咯酮(N-methyl-2-pyrrolidinone)投入至反应器中。在接着将185g的三乙胺与275g的特戊酸氯甲酯加入至反应器之后,加热混合物直到反应温度到达45°C并搅拌12小时。在降低反应温度到10°C至20°C之后,加入1372ml的乙酸异丙酯,接着搅拌。过滤反应混合物以移除副产物,并以457ml的乙酸异丙酯清洗。加入360ml的蒸馏水,搅拌5分钟,且分离有机层。以360ml的蒸馏水清洗分离出来的有机层两次。结合用于清洗的蒸馏水,再以360ml的乙酸异丙酯萃取。xa0实例3:以化学式1所表示的阿德福韦酯,9-[2-[[双{(新戊酰氧基)-甲氧基}氧膦基]甲氧基]乙基]腺嘌呤的纯化方法xa0将3000ml的蒸馏水加至实例1所获得的有机层中。在添加1N盐酸以将蒸馏水的pH值调整至1.8之后,在20°C至25°C的温度下搅拌10分钟。停止搅拌,接着分离水层。使分离出来的水层通过C₁₈逆相管柱(尺寸:40×15cm,填充物质:KP-C₁₈-HSTMxa035~70μm、xa0ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="134"/>结合C18的氧化硅(xa0ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="110"/>C18-bondedxa0silica),制造商:百特基(Biotage))。xa0收集通过C₁₈逆相管柱的水溶液,依序地以甲醇及pHxa02.0的盐酸溶液清洗C₁₈逆相管柱。xa0在使回收的水溶液通过C₁₈逆相管柱并从C₁₈逆相管柱洗提之后,将重新收集的水溶液与500ml的二氯甲烷混合。一滴一滴地将5%碳酸氢钠(sodiumbicarbonate)加入至反应混合物中,并同时搅拌以将收集的水溶液的pH值调整到5.7至5.8的范围。xa0在停止搅拌之后,分离二氯甲烷,接着以硫酸钠脱水,以及进行过滤。xa0在减压的情况下浓缩经过滤的二氯甲烷,因而获得非晶高纯度以化学式1所表示的阿德福韦酯(产率:42g(23.4%),含量:99.6%,纯度:99.8%)。xa0实例4:以化学式1所表示的阿德福韦酯,9-[2-[[双{(新戊酰氧基)-甲氧基}氧膦基]甲氧基]乙基]腺嘌呤的纯化方法xa0将3000ml的蒸馏水加至实例1所获得的有机层中。在添加1N盐酸以将蒸馏水的pH值调整至1.8之后,在20°C至25°C的温度下搅拌10分钟。停止搅拌,接着分离水层。使分离出来的水层通过C₁₈逆相管柱(尺寸:40×15cm,填充物质:KP-C₁₈-HSTMxa035~70μm、xa0ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="103"/>结合C18的氧化硅,制造商:Biotage)。xa0收集通过C₁₈逆相管柱的水溶液,依序地以甲醇及pHxa02.0的盐酸溶液清洗C₁₈逆相管柱。xa0在使回收的水溶液再次通过C₁₈逆相管柱并从C₁₈逆相管柱洗提之后,将重新收集的水溶液与500ml的二氯甲烷混合。一滴一滴地将5%碳酸氢钠加入至反应混合物中,并同时搅拌以将收集的水溶液的pH值调整到5.5至5.6的范围。xa0在停止搅拌之后,分离二氯甲烷,接着以硫酸钠脱水,以及进行过滤。xa0在减压的情况下浓缩经过滤的二氯甲烷。将500ml的正己烷加入至结果的固体中,搅拌并接着过滤,因而获得非晶高纯度以化学式1所表示的阿德福韦酯(产率:43g(23.9%),含量:99.7%,纯度:99.8%)。xa0实例5:以化学式1所表示的阿德福韦酯,9-[2-[[双{(新戊酰氧基)-甲氧基}氧膦基]甲氧基]乙基]腺嘌呤的纯化方法xa0将3000ml的蒸馏水加至实例1所获得的有机层中。在添加甲磺酸以将蒸馏水的pH值调整至2.2之后,在20°C至25°C的温度下搅拌10分钟。停止搅拌,接着分离水层。使分离出来的水层通过C₁₈逆相管柱(尺寸:40×15cm,填充物质:KP-C₁₈-HSTMxa035~70μm、xa0ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="103"/>结合C18的氧化硅,制造商:Biotage)。xa0收集通过C₁₈逆相管柱的水溶液,依序地以甲醇及pHxa02.3的盐酸溶液清洗C₁₈逆相管柱。xa0在使回收的水溶液通过C₁₈逆相管柱并从C₁₈逆相管柱洗提之后,将重新收集的水溶液与500ml的二氯甲烷混合。一滴一滴地将5%碳酸氢钠加入至反应混合物中,并同时搅拌以将收集的水溶液的pH值调整到3.2至3.3的范围。xa0在停止搅拌之后,分离二氯甲烷,接着以硫酸钠脱水,以及进行过滤。xa0在减压的情况下浓缩经过滤的二氯甲烷,因而获得非晶高纯度以化学式1所表示的阿德福韦酯(产率:45g(25.1%),含量:99.7%,纯度:99.8%)。xa0实例6:以化学式1所表示的阿德福韦酯,9-[2-[[双{(新戊酰氧基)-甲氧基}氧膦基]甲氧基]乙基]腺嘌呤的纯化方法xa0将3000ml的蒸馏水加至实例1所获得的有机层中。在添加甲磺酸以将蒸馏水的pH值调整至2.0之后,在20°C至25°C的温度下搅拌10分钟。停止搅拌,接着分离水层。使分离出来的水层通过C₁₈逆相管柱(尺寸:40×15cm,填充物质:KP-C₁₈-HSTMxa035~70μm、xa0ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="105"/>结合C18的氧化硅,制造商:Biotage)。收集通过C₁₈逆相管柱的水溶液,依序地以甲醇及pHxa02.3的盐酸溶液清洗C₁₈逆相管柱。xa0在使回收的水溶液通过C₁₈逆相管柱并从C₁₈逆相管柱洗提之后,将重新xa0收集的水溶液与500ml的二氯甲烷混合。一滴一滴地将5%碳酸氢钠加入至反应混合物中,并同时搅拌以将收集的水溶液的PH值调整到3.5至3.6的范围。xa0在停止搅拌之后,分离二氯甲烷,接着以硫酸钠脱水,以及进行过滤。xa0在减压的情况下浓缩经过滤的二氯甲烷,因而获得非晶高纯度以化学式1所表示的阿德福韦酯(产率:44g(24.5%),含量:99.5%,纯度:99.7%)。xa0实例7:以化学式1所表示的阿德福韦酯,9-[2-[[双{(新戊酰氧基)-甲氧基}氧膦基]甲氧基]乙基]腺嘌呤的纯化方法xa0将3000ml的蒸馏水加至实例1所获得的有机层中。在添加甲磺酸以将蒸馏水的pH值调整至2.1之后,在20°C至25°C的温度下搅拌10分钟。停止搅拌,接着分离水层。使分离出来的水层通过C₁₈逆相管柱(尺寸:40×15cm,填充物质:KP-C₁₈-HSTMxa035~70μm、xa0ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="103"/>结合C18的氧化硅,制造商:Biotage)。之后,使1000ml的pHxa02.3的盐酸溶液通过相同管柱,因此使其与先前的流出物(effluent)结合。xa0收集通过C₁₈逆相管柱的水溶液,依序地以甲醇及pHxa02.3的盐酸溶液清洗C₁₈逆相管柱。xa0在使回收的水溶液通过C₁₈逆相管柱并从C₁₈逆相管柱洗提之后,使1000ml的pHxa02.3的盐酸溶液通过相同管柱,因此使其与先前的流出物结合。xa0将重新收集的水溶液与500ml的二氯甲烷混合。一滴一滴地将5%碳酸氢钠加入至反应混合物中,并同时搅拌以将收集的水溶液的pH值调整到4.8至5.0的范围。xa0在停止搅拌之后,分离二氯甲烷,接着以硫酸钠脱水,以及进行过滤。xa0在减压的情况下浓缩经过滤的二氯甲烷,因而获得非晶高纯度以化学式1所表示的阿德福韦酯(产率:47g(26.2%),含量:99.4%,纯度:99.5%)。xa0实例8:以化学式1所表示的阿德福韦酯,9-[2-[[双{(新戊酰氧基)-甲氧基}氧膦基]甲氧基]乙基]腺嘌呤的纯化方法xa0将3000ml的蒸馏水加至实例2所获得的有机层中。在添加1N盐酸以将蒸馏水的pH值调整至1.8之后,在20°C至25°C的温度下搅拌10分钟。停止搅拌,接着分离水层。使分离出来的水层通过C₁₈逆相管柱(尺寸:40×15cm,填充物质:KP-C₁₈-HSTMxa035~70μm、xa0ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="120"/>结合C18的氧化硅,制造商:Biotage)。xa0收集通过C₁₈逆相管柱的水溶液,依序地以甲醇及pHxa02.0的盐酸溶液清洗C₁₈逆相管柱。xa0在使回收的水溶液通过C₁₈逆相管柱并从C₁₈逆相管柱洗提之后,将重新收集的水溶液与500ml的二氯甲烷混合。一滴一滴地将5%碳酸氢钠加入至反应混合物中,并同时搅拌以将收集的水溶液的pH值调整到3.2至3.3的范围。xa0在停止搅拌之后,分离二氯甲烷,接着以硫酸钠脱水,以及进行过滤。xa0在减压的情况下浓缩经过滤的二氯甲烷,因而获得非晶高纯度以化学式1所表示的阿德福韦酯(产率:38g(21.2%),含量:99.4%,纯度:99.8%)。xa0实例9:以化学式1所表示的阿德福韦酯,9-[2-[[双{(新戊酰氧基)-甲氧基}氧膦基]甲氧基]乙基]腺嘌呤的纯化方法xa0将3000ml的蒸馏水加至实例2所获得的有机层中。在添加1N盐酸以将蒸馏水的pH值调整至1.8之后,在20°C至25°C的温度下搅拌10分钟。停止搅拌,接着分离水层。使分离出来的水层通过C₁₈逆相管柱(尺寸:40×15cm,填充物质:KP-C₁₈-HSTMxa035~70μm、xa0ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="136"/>结合C18的氧化硅,制造商:Biotage)。xa0收集通过C₁₈逆相管柱的水溶液,依序地以甲醇及pHxa02.0的盐酸溶液清洗C₁₈逆相管柱。xa0在使回收的水溶液通过C₁₈逆相管柱并从C₁₈逆相管柱洗提之后,将重新收集的水溶液与500ml的二氯甲烷混合。一滴一滴地将5%碳酸氢钠加入至反应混合物中,并同时搅拌以将收集的水溶液的pH值调整到3.2至3.3的范围。xa0在停止搅拌之后,分离二氯甲烷,接着以硫酸钠脱水,以及进行过滤。xa0在减压的情况下浓缩经过滤的二氯甲烷,而得到100ml的体积。在将1700ml的正己烷投入至另一个反应器中并冷却至-50°C或以下的温度之后,一滴一滴地将100ml的经浓缩的二氯甲烷加入至反应器中达10分钟,接着在-50°C或以下的温度过滤。在减压及30°C的情况下使所获得的滤液干燥12小时,因而获得非晶高纯度以化学式1所表示的阿德福韦酯(产率:39g(21.2%),含量:99.4%,纯度:99.7%)。xa0实例10:以化学式1所表示的阿德福韦酯,9-[2-[[双{(新戊酰氧基)-甲氧基}氧膦基]甲氧基]乙基]腺嘌呤的纯化方法xa0将3000ml的蒸馏水加至实例2所获得的有机层中。在添加甲磺酸以将蒸馏水的pH值调整至2.0之后,在20°C至25°C的温度下搅拌10分钟。停止搅拌,接着分离水层。使分离出来的水层通过C₁₈逆相管柱(尺寸:40×15cm,填充物质:KP-C₁₈-HSTMxa035~70μm、xa0ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="114"/>结合C18的氧化硅,制造商:Biotage)。xa0收集通过C₁₈逆相管柱的水溶液,依序地以甲醇及pHxa02.0的盐酸溶液清洗C₁₈逆相管柱。xa0在使回收的水溶液通过C₁₈逆相管柱并从C₁₈逆相管柱洗提之后,将重新收集的水溶液与500ml的二氯甲烷混合。一滴一滴地将5%碳酸氢钠加入至反应混合物中,并同时搅拌以将收集的水溶液的pH值调整到3.2至3.3的范围。xa0在停止搅拌之后,分离二氯甲烷,接着以硫酸钠脱水,以及进行过滤。xa0在减压的情况下浓缩经过滤的二氯甲烷,而得到100ml的体积。在将2000ml的环已烷投入至另一个反应器中并冷却至-60°C或以下的温度之后,一滴一滴地将100ml的经浓缩的二氯甲烷加入至反应器中达10分钟,接着在-50°C或以下的温度过滤。在减压及30°C的情况下使所获得的滤液干燥12小时,因而获得非晶高纯度以化学式1所表示的阿德福韦酯(产率:46g(25.6%),含量:99.5%,纯度:99.7%)。xa0实例11:以化学式1所表示的阿德福韦酯,9-[2-[[双{(新戊酰氧基)-甲氧基}氧膦基]甲氧基]乙基]腺嘌呤的纯化方法xa0将3000ml的蒸馏水加至实例2所获得的有机层中。在添加甲磺酸以将蒸馏水的pH值调整至2.0之后,在20°C至25°C的温度下搅拌10分钟。停止搅拌,接着分离水层。使分离出来的水层通过C₁₈逆相管柱(尺寸:40×15cm,填充物质:KP-C₁₈-HSTMxa035~70μm、xa0ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="103"/>结合C18的氧化硅,制造商:Biotage)。xa0收集通过C₁₈逆相管柱的水溶液,依序地以甲醇及pHxa02.0的盐酸溶液清洗C₁₈逆相管柱。xa0在使回收的水溶液通过C₁₈逆相管柱并从C₁₈逆相管柱洗提之后,将重新收集的水溶液与500ml的二氯甲烷混合。一滴一滴地将5%碳酸氢钠加入至反应混合物中,并同时搅拌以将收集的水溶液的pH值调整到3.2至3.3的范围。xa0在停止搅拌之后,分离二氯甲烷,接着以硫酸钠脱水,以及进行过滤。xa0在减压的情况下浓缩经过滤的二氯甲烷,而得到100ml的体积。在将1800ml的正庚烷投入至另一个反应器中并冷却至-50°C或以下的温度之后,一滴一滴地将100ml的经浓缩的二氯甲烷加入至反应器中达10分钟,接着在-50°C或以下的温度过滤。在减压及30°C的情况下使所获得的滤液干燥12小时,因而获得非晶高纯度以化学式1所表示的阿德福韦酯(产率:45g(25.1%),含量:99.4%,纯度:99.5%)。实例12:以化学式1所表示的阿德福韦酯,9-[2-[[双{(新戊酰氧基)-甲氧基}氧膦基]甲氧基]乙基]腺嘌呤的纯化方法xa0将3000ml的蒸馏水加至实例1所获得的有机层中。在添加甲磺酸以将蒸馏水的pH值调整至2.0之后,在20°C至25°C的温度下搅拌10分钟。停止搅拌,接着分离水层。将100g的C₁₈球形填充颗粒(sphericalxa0packagingparticle)(经销商:梨树化学公司(ISUxa0Chemicalxa0Company),商品名:ODS-W)加入至分离出来的水层中,在20°C至25°C的温度下搅拌30分钟,接着过滤。xa0将100g的C18球形填充颗粒(经销商:ISUxa0Chemicalxa0Company,商品名:ODS-W)加入至经过滤的水溶液中,在20°C至25°C的温度下搅拌30分钟,接着过滤两次。xa0在使回收的水溶液通过C₁₈逆相管柱并从C₁₈逆相管柱洗提之后,将重新收集的水溶液与500ml的二氯甲烷混合。一滴一滴地将5%碳酸氢钠加入至反应混合物中,并同时搅拌以将收集的水溶液的pH值调整到3.2至3.3的范围。xa0在停止搅拌之后,分离二氯甲烷,接着以硫酸钠脱水,以及进行过滤。xa0在减压的情况下浓缩经过滤的二氯甲烷,而得到100ml的体积。在将2000ml的环已烷投入至另一个反应器中并冷却至-60°C或以下的温度之后,一滴一滴地将100ml的经浓缩的二氯甲烷加入至反应器中达10分钟,接着在-50°C或以下的温度过滤。在减压及30°C的情况下使所获得的滤液干燥12小时,因而获得非晶高纯度以化学式1所表示的阿德福韦酯(产率:48g(26.7%),含量:99.1%,纯度:99.2%)。xa0实例13:以化学式1所表示的阿德福韦酯,9-[2-[[双{(新戊酰氧基)-甲氧基}氧膦基]甲氧基]乙基]腺嘌呤的纯化方法xa0将3000ml的蒸馏水加至实例2所获得的有机层中。在添加甲磺酸以将蒸馏水的pH值调整至2.0之后,在20°C至25°C的温度下搅拌10分钟。停止搅拌,接着分离水层。将100g的C₁₈球形填充颗粒(经销商:ISUxa0ChemicalCompany,商品名:ODS-W)加入至分离出来的水层中,在20°C至25°C的温度下搅拌30分钟,接着过滤。xa0将100g的C₁₈球形填充颗粒(经销商:ISUxa0Chemicalxa0Company,商品名:ODS-W)加入至经过滤的水溶液中,在20°C至25°C的温度下搅拌30分钟,接着过滤两次。xa0在使回收的水溶液通过C₁₈逆相管柱并从C₁₈逆相管柱洗提之后,将重新收集的水溶液与500ml的二氯甲烷混合。一滴一滴地将5%碳酸氢钠加入至反应混合物中,并同时搅拌以将收集的水溶液的pH值调整到3.2至3.3的范围。xa0在停止搅拌之后,分离二氯甲烷,接着以硫酸钠脱水,以及进行过滤。xa0在减压的情况下浓缩经过滤的二氯甲烷,而得到100ml的体积。在将2000ml的环已烷投入至另一个反应器中并冷却至-60°C或以下的温度之后,一滴一滴地将100ml的经浓缩的二氯甲烷加入至反应器中达10分钟,接着在-50°C或以下的温度过滤。在减压及30°C的情况下使所获得的滤液干燥12小时,因而获得非晶高纯度以化学式1所表示的阿德福韦酯(产率:45g(25.0%),含量:99.0%,纯度:99.1%)。xa0实例14:以化学式1所表示的阿德福韦酯,9-[2-[[双{(新戊酰氧基)-甲氧基}氧膦基]甲氧基]乙基]腺嘌呤的纯化方法xa0将3000ml的蒸馏水加至实例1所获得的有机层中。在添加甲磺酸以将蒸馏水的pH值调整至2.0之后,在20°C至25°C的温度下搅拌10分钟。停止搅拌,接着分离水层。将130g的C₁₈球形填充颗粒(经销商:ISUxa0ChemicalCompany,商品名:ODS-W)加入至分离出来的水层中,在20°C至25°C的xa0温度下搅拌30分钟,接着过滤。xa0将100g的C₁₈球形填充颗粒(经销商:ISUxa0Chemicalxa0Company,商品名:ODS-W)加入至经过滤的水溶液中,在20°C至25°C的温度下搅拌30分钟,接着过滤两次。xa0在使回收的水溶液通过C₁₈逆相管柱并从C₁₈逆相管柱洗提之后,将重新收集的水溶液与500ml的二氯甲烷混合。一滴一滴地将5%碳酸氢钠加入至反应混合物中,并同时搅拌以将收集的水溶液的pH值调整到3.2至3.3的范围。xa0在停止搅拌之后,分离二氯甲烷,接着以硫酸钠脱水,以及进行过滤。xa0在减压的情况下浓缩经过滤的二氯甲烷,而得到100ml的体积。在将2000ml的环已烷投入至另一个反应器中并冷却至-60°C或以下的温度之后,一滴一滴地将100ml的经浓缩的二氯甲烷加入至反应器中达10分钟,接着在-50°C或以下的温度过滤。在减压及30°C的情况下使所获得的滤液干燥12小时,因而获得非晶高纯度以化学式1所表示的阿德福韦酯(产率:38g(21.1%),含量:99.2%,纯度:99.3%)。xa0实例15:以化学式1所表示的阿德福韦酯,9-[2-[[双{(新戊酰氧基)-甲氧基}氧膦基]甲氧基]乙基]腺嘌呤的纯化方法xa0将3000ml的蒸馏水加至实例1所获得的有机层中。在添加盐酸以将蒸馏水的pH值调整至2.1之后,在20°C至25°C的温度下搅拌10分钟。停止搅拌,接着分离水层。将100g的C₁₈球形填充颗粒(经销商:ISUxa0ChemicalCompany,商品名:ODS-W)加入至分离出来的水层中,在20°C至25°C的温度下搅拌30分钟,接着过滤。xa0将130g的C₁₈球形填充颗粒(经销商:ISUxa0Chemicalxa0Company,商品名:ODS-W)加入至经过滤的水溶液中,在20°C至25°C的温度下搅拌30分钟,接着过滤两次。xa0在使回收的水溶液通过C₁₈逆相管柱并从C₁₈逆相管柱洗提之后,将重新收集的水溶液与500ml的二氯甲烷混合。一滴一滴地将5%碳酸氢钠加入至反应混合物中,并同时搅拌以将收集的水溶液的pH值调整到3.2至3.3的范围。xa0在停止搅拌之后,分离二氯甲烷,接着以硫酸钠脱水,以及进行过滤。xa0在减压的情况下浓缩经过滤的二氯甲烷,而得到100ml的体积。在将2000ml的环已烷投入至另一个反应器中并冷却至-60°C或以下的温度之后,一滴一滴地将100ml的经浓缩的二氯甲烷加入至反应器中达10分钟,接着在-50°C或以下的温度过滤。在减压及30°C的情况下使所获得的滤液干燥12小时,因而获得非晶高纯度以化学式1所表示的阿德福韦酯(产率:36g(20.0%),含量:99.0%,纯度:99.2%)。xa0比较实例1:以化学式1所表示的阿德福韦酯,9-[2-[[双{(新戊酰氧基)-甲氧基}氧膦基]甲氧基]乙基]腺嘌呤的纯化方法(正相管柱)xa0在将3000ml的蒸馏水加至实例1所获得的有机层中之后,在20°C至25°C的温度下搅拌10分钟。停止搅拌,接着分离有机层。然后,将1000ml的蒸馏水投入至其中,并在20°C至25°C的温度下搅拌10分钟,因而分离出有机层。通过添加硫酸钠使经分离的有机层脱水,以及进行过滤。在减压的情况下浓缩经过滤的有机层,以及进行正相管柱层析法,其中以硅胶作为固定相并以甲醇:二氯甲烷(5%:95%体积比)作为流动相。通过使用硫酸钠使从正相管柱洗提的有机溶剂层部分脱水,接着过滤,并在减压的情况下浓缩,因而获得非晶以化学式1所表示的阿德福韦酯(产率:41g(22.7%),含量:58.1%,纯度:59.3%)。xa0比较实例2:以化学式1所表示的阿德福韦酯,9-[2-[[双{(新戊酰氧基)-甲氧基}氧膦基]甲氧基]乙基]腺嘌呤的纯化方法(正相管柱)xa0在将3000ml的蒸馏水加至实例2所获得的有机层中之后,在20°C至25°C的温度下搅拌10分钟。停止搅拌,接着分离有机层。然后,将1000ml的蒸馏水投入至其中,并在20°C至25°C的温度下搅拌10分钟,因而分离出有机层。通过添加硫酸钠使经分离的有机层脱水,以及进行过滤。在减压的情况下浓缩经过滤的有机层,以及进行正相管柱层析法,其中以硅胶作为固定相并以甲醇:二氯甲烷(5%:95%体积比)作为流动相。通过使用硫酸钠使从正相管柱洗提的有机溶剂层部分脱水,接着过滤,并在减压的情况下浓缩,因而获得非晶以化学式1所表示的阿德福韦酯(产率:41g(22.7%),含量:72.2%,纯度:72.8%)。xa0